在购买细胞的时候，很多细胞都会写着P3，特别是原代细胞，往往给很多客户造成误解？ 你怎么可以发给我P3代的原代，很多人都会去问，为什么不发P0代？
我们来看看细胞是怎么标记代次的：
如果把从组织中提取出来的贴壁细胞称之为P0代，那么第一次进行酶消化后的细胞就是P1代，为什么进行酶消化 ，因为P0代的细胞通常纯度不高，所以要争取更大的密度去进行磁珠筛选，我们一般会在P1代传代时进行磁珠筛选，筛选后的细胞长满后，进行稳定扩增一代，这时候已经时P2代 ，稳定扩增的这一代细胞就可以冻存保种了，这就是P3代的由来，实际是P2代冻存，所以它解冻复苏时仍是冻存管标记的P3代。
就比如你有一个工作细胞系 第1代（P1），然后用胰蛋白酶消化并冷冻这些细胞，然后把小瓶标记为 P2解冻后，它们仍然 P2 直到你再次对它们进行传代，此时它们就变成了 P3。
为什么大部分原代细胞说明的是倍增次数（PD）而不是传代次数？
（1）研究员 A 使用 10:1 的比例分割 P6 的培养物。
（2）研究员 B 在 P6 时以 1:10 的比例分割相同的培养物。
（3）两人都将下一个烧瓶标记为 P7。
然而，1:10 分裂的细胞必须增殖更多才能达到汇合，这意味着它们会经历的细胞倍增次数（PD）更多。 随着时间的推移，即使传代次数相同，也会导致细胞在基因和功能上有所不同。
因此细胞的铺板和冻存密度一定要注意！
比如内皮和神经元细胞，需要细胞与细胞能互相接触才能自身产生细胞生长因子，细胞生长的更快而且形态也规整，而成纤维细胞 ，偶尔稀疏点也能长起来，普遍的细胞铺板标准，不能低于整体汇合度的30%,使用正确的培养基，在细胞没有任何受损的情况下它们基本都能长起来。
那么什么是细胞汇合？
汇合度不是直接计数细胞，而是 表面覆盖度的视觉评估. 例如，70％汇合的培养瓶有70％的表面积被贴壁细胞占据。
汇合度可以帮您确定：
（1）何时分裂或传代细胞
（2）转染或药物治疗的最佳时间
（3）培养物是否适合分化、重编程或收获等下游应用
细胞过度汇合会带来什么？
（1）营养耗竭和代谢压力
（2）细胞进入生长平鼎期、造成细胞衰老或凋亡
（3）垂死细胞积累有毒的细胞碎片
（4）细胞挤压造成的形态和基因表达改变
（5）更高污染的风险，特别是真菌或细菌
怎么更好的培养出让你满意的细胞，还有最重要的一点就是：不随意更换细胞的培养方式 ，内皮的细胞采用内皮的培养基，成纤维的采用成纤维的培养基，这样细胞从始到终表达的蛋白基本会保持一致。
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